凋亡檢測8大要點

細胞凋亡（Apoptosis）：屬于細胞程序性死亡（Programmed Cell Death，PCD），是為維持內環境穩定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡，屬于細胞的“自殺”行為。蝌蚪褪去尾巴變成青蛙就是生物學中典型的細胞凋亡現象。

凋亡異常與常見疾病

細胞凋亡典型特征

早期事件 1 磷脂酰絲氨酸（PS）外翻 2 線粒體受損 3 細胞色素C釋放	中期事件 Caspase活化	晚期事件 DNA片段化

Annexin V 檢測凋亡八大要點

1. 接種——對數生長

細胞密度通常不超過1×10⁶/ml，以免引起凋亡。

2. 收集——上清消化全收

因部分凋亡細胞可能懸浮于培養基中，須先收集上清，離心收集沉淀，再消化收集貼壁細胞，合并上清和消化下來的細胞。

3. 消化——選用Accutase酶

選用Accutase酶替代胰酶，在多種細胞系中得到驗證，消化更溫和、長時間消化也沒有影響，有效避免因消化過度使PS外翻，造成假陽性（對凋亡不明顯的實驗強烈推薦）。

4. 補償調節——陽性質控

沒有明顯的凋亡，該如何調節補償以及設門？聯科生物凋亡試劑盒配備陽性質控液，使補償調節so easy。

5. 電壓——足夠大

大到快要超出邊界。

6. 細胞數量——足夠多

多到細胞全部收集。

7. 補償——橫平豎直

3、4象限橫平；2、4象限豎直

8. 漂亮結果——黃金分割（三分原則）